Méthode ELISA Sandwich pour la détermination quantitative du facteur tissulaire entier (full length) dans le plasma humain, milieux biologiques ou préparations purifiées. Calibrateurs et contrôles inclus, qui sont des produits recombinants (1-263). Le FT est l'initiateur physiologique de la coagulation. C'est une protéine transmembranaire synthétisée par les cellules endothéliales. Le FT se lie au Facteur VIIa pour former un complexe FVIIa-FT qui active les FIX et FX en FIXa et FXa respectivement.
Principe Dans un premier temps, la solution AE-TF et l'échantillon à tester sont introduits dans les puits de la plaque sensibilisée par un anticorps monoclonal spécifique du FL-FT. Le FL-FT présent dans l'échantillon se fixe sur la phase solide par un de ses épitopes. Dans un second temps, un anticorps monoclonal couplé à la biotine spécifique d'un autre épitope, est introduit et se fixe sur le FL-FT immobilisé sur la plaque. Dans un troisième temps, un conjugué Horseradish Peroxydase-Streptavidine est ajouté et se fixe sur l'anticorps biotinylé. Le substrat de la péroxydase (TMB-HS), en présence d'eau oxygénée, est introduit dans les puits et une coloration bleue se développe. L'arrêt de la réaction par l'acide sulfurique fait virer la coloration au jaune. Cette coloration est directement proportionnelle à la quantité de FL-FT humain présent dans l'échantillon à doser. Données-clés
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