Méthode ELISA pour la détermination qualitative de l'activité PAI-1 dans le plasma ou tout autre milieu biologique. Les microplaques coatées de t-PA captent le PAI-1 actif de l'échantillon.
Le PAI-1 est une glycoprotéine de 50 kDa, inhibitrice des sérine protéases t-PA et urokinase, synthétisée par les cellules endothéliales et le tissu adipeux. C'est un inhibiteur régulateur de de la fibrinolyse.
Principe
Le plasma dilué ou l'échantillon à tester sont introduits dans les puits d'une plaque ELISA, coatée avec du tPA recombinant et stabilisée. Quant il est présent, le PAI-1 actif réagit avec le tPA immobilisé. Seules les formes actives de PAI-1 sont retenues sur la phase solide. Après une étape de lavages, l'immunoconjugué, anticorps monoclonal de souris spécifique du PAI-1 humain et couplé à la péroxydase, est introduit et réagit avec le PAI-1 immobilisé. Après lavage, le substrat TMB est introduit dans les puits de la plaque et une coloration se développe. Cette coloration est proportionnelle à la quantité de PAI-1 actif présent dans l'échantillon testé.
Données clés
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