Einstufige ELISA-Methode für die quantitative Bestimmung des humanen FIX-Antigens in Plasma oder anderen biologischen Medien. Alle Reagenzien sind im Kit enthalten.
Faktor IX ist ein 57 kDa großes Vitamin-K-abhängiges Glykoprotein, das von der Leber synthetisiert wird und zur Gruppe der Serinproteasen gehört. Wenn FIX durch FXIa zu FIXa aktiviert wird, bildet FIXa einen Komplex mit FVIIIa. Der FVIIIa-FIXa-Komplex aktiviert FX zu FXa.
Prinzip
Zunächst wird das Immunkonjugat, ein polyklonaler Antikörper vom Kaninchen, der für FIX spezifisch und an Peroxidase (HRP) gekoppelt ist, in die Vertiefungen der ELISA-Platte einpipettiert, die mit einem ebenfalls für FIX spezifischen polyklonalen Antikörper sensibilisiert wurde. Unmittelbar danach wird die verdünnte Testprobe eingebracht. Das in der Probe vorhandene FIX bindet sich über eines seiner Epitope an die feste Phase und reagiert mit dem zweiten polyklonalen Antikörper, der an Peroxidase gekoppelt ist, über seine freien Epitope. Nach dem Waschen wird das TMB-Substrat in die Vertiefungen der Platte eingebracht und es bildet sich eine Färbung. Diese Färbung ist proportional zur Menge an FIX, die in der Testprobe vorhanden ist.
Eckdaten -12 Streifen mit je 8 Mikrowells. -Inklusive Kalibratoren (validiert mit NIBSC International Standard) und Kontrollen.
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