Einstufige Sandwich-ELISA-Methode für die quantitative Bestimmung von Protein Z (PZ) in humanem Plasma oder einem anderen biologischen Medium. Alle Reagenzien sind im Kit enthalten. PZ ist ein 62 kDa großes Vitamin-K-abhängiges Glykoprotein. In Gegenwart von Ca2+ und Phospholipiden hemmt der PZ-Inhibitorkomplex des Z-Proteins den FXa. Die normale Plasmakonzentration von PZ schwankt zwischen 1 und 4 µg/ml.
Prinzip: Zunächst wird das Immunokonjugat, ein polyklonaler Antikörper vom Kaninchen, der für PZ spezifisch und an Peroxidase gekoppelt ist, in die Vertiefung der Mikrotiterplatte pipettiert, die mit einem anderen polyklonalen Antikörper, der ebenfalls für PZ spezifisch ist, sensibilisiert wurde. Unmittelbar danach wird die zu testende Probe in den Brunnen gegeben. Das in der Probe vorhandene PZ bindet über eines seiner Epitope an den immobilisierten Antikörper, das Immunokonjugat bindet über die anderen freien Epitope an das PZ. Nach dem Waschen wird das TMB-Substrat in die Vertiefung eingebracht und es bildet sich eine Färbung. Die Färbung ist proportional zur Menge an PZ, die in der Testprobe vorhanden ist.
Schlüsseldaten:
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