ELISA Methode für die quantitative Bestimmung von humanem FV-Antigen in Plasma oder einem anderen biologischen Medium. Der Test misst den menschlichen Faktor V, auch den menschlichen Faktor Va mit verringter Aktivität. Kalibratoren und Kontrollen enthalten.
Faktor V ist ein 300 000 Da großes einkettiges Glykoprotein, das von der Leber und den Megakaryozyten synthetisiert wird. Nach Aktivierung durch Thrombin besteht Faktor Va aus 2 Ketten (eine schwere, die andere leichte), die durch ein Calciumion verbunden sind. Faktor Va wird durch C-reaktives Protein inaktiviert und schnell abgebaut, während mutierter Faktor V (R306Q) gegen diesen Abbau resistent ist. Die Plasmakonzentration von Faktor V beträgt 10 µg/ml.
Prinzip:
Das zu testende Plasma oder die Probe wird in eine der Vertiefungen der sensibilisierten Platte einpipettiert. Faktor V bindet an den immobilisierten Antikörper. Nach dem Waschen wird der fixierte Faktor V durch das Immunkonjugat, polyklonaler Pferdeantikörper, konjugiert mit Peroxidase (HRP), der mit den freien Epitopen von Faktor V reagiert, nachgewiesen. Nach dem Waschen wird das Substrat Tetramethylbenzidin (TMB) in die Vertiefungen der Platte eingebracht und es bildet sich eine Färbung. Diese Färbung ist proportional zum Spiegel des im Plasma oder in der getesteten Probe vorhandenen Faktor-V-Antigens.
Eckdaten:
12 Streiffen mit 8 microwells Kalibrations- und Kontrollplasmen im Kit enthalten.
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